表观遗传学

CUT&Tag-seq

2023-11-11

CUT&Tag-Seq 介绍

CUT&Tag (Cleavage Under Targets and Tagmentation) 是蛋白-DNA 互作的一大革新技术,该技术核心为Hyperactive pG-Tn5/pA-Tn5 Transposase,该酶是将Protein G/A 与经过工程学改造的超高活性 Tn5 转座酶进行融合,形成同时具备转座酶与 Protein G/A 活性的新型融合酶,专门适用于蛋白质-基因组互作研究CUT&Tag 技术核心酶。


          技术优势

1、CUT&Tag技术不需要使用甲醛交联以及免疫共沉淀,而是通过针对靶蛋白或转录因子等的抗体和 Protein G/A 的介导,使得与Protein G/A 融合的Tn5 酶在切割DNA 片段的同时在序列两端加上测序接头,经过 PCR 扩增后形成可以直接用于高通量测序的文库。2、CUT&Tag技术无需交联与超声打断操作,规避了其所引起的抗原决定簇遮盖和样本损失问题,提高了信噪比,降低了样本起始量。


         应用领域

CUT&Tag技术可从基因组范围内检测组蛋白、 RNA polymerase II 和转录因子等蛋白质结合的 DNA 区域,应用于临床和科研的表观遗传学研究,或是结合生物信息学分析,找到转录因子下游调控的靶基因,为进一步阐明生物学机制提供依据。

         技术优势

1、CUT&Tag技术不需要使用甲醛交联以及免疫共沉淀,而是通过针对靶蛋白或转录因子等的抗体和 Protein G/A 的介导,使得与Protein G/A 融合的Tn5 酶在切割DNA 片段的同时在序列两端加上测序接头,经过 PCR 扩增后形成可以直接用于高通量测序的文库。2、CUT&Tag技术无需交联与超声打断操作,规避了其所引起的抗原决定簇遮盖和样本损失问题,提高了信噪比,降低了样本起始量。


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